迟缓爱德华菌FliC-TolC融合蛋白表达及免疫特性研究

更新时间:2023-05-28

【摘要】鞭毛蛋白FliC与外膜蛋白TolC均具有免疫保护效果,其中FliC蛋白具有疫苗佐剂的特性,但目前尚未有关迟缓爱德华菌(E. tarda)FliC-TolC融合产物免疫动物的免疫效果的相关报道。为研究E. tarda FliC-TolC融合蛋白的免疫特性,本研究利用融合PCR方法扩增获得fliC-tolC片段,构建重组载体pET-28a-fliC-tolC,并利用E. coli BL21表达系统表达了融合蛋白FliC-TolC。将纯化的FliC-TolC、TolC、FliC蛋白免疫小鼠后,以E. tarda强毒株攻毒评估免疫效果;并利用斑马鱼模型进行了平行试验。结果显示,本研究克隆了E. tarda fliC-tolC基因并表达和纯化了相应重组蛋白FliC-TolC;FliC-TolC蛋白激发小鼠产生的抗体水平优于FliC、TolC蛋白单独免疫组,表明FliC-TolC蛋白具有优良的免疫原性。攻毒试验表明FliC-TolC蛋白组小鼠对强毒株可产生较好的抵抗力,相对保护率为95%;斑马鱼攻毒试验相对保护率为60%。本研究证实了E. tarda重组蛋白FliC-TolC的免疫效力,为进一步研制E. tarda亚单位疫苗提供了参考和借鉴。

【关键词】 迟缓爱德华菌 FliC-TolC融合蛋白 蛋白表达 免疫保护力

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